В химии разбавление - это процесс уменьшения концентрации вещества в растворе. Цепное разбавление - это повторное разбавление раствора для быстрого увеличения коэффициента разбавления. Эта процедура обычно выполняется в экспериментах, требующих очень разбавленных растворов с высокой точностью. Например, эксперименты с кривыми концентрации в логарифмическом масштабе или эксперименты по определению плотности бактерий. Цепные разведения широко используются в научных экспериментах, таких как биохимия, микробиология, фармакология и физика.
Шаг
Метод 1 из 2: выполнение основного разведения
Шаг 1. Определите подходящий раствор разбавителя
Очень важно определить жидкость, которая будет использоваться для разведения. Многие растворы растворимы в дистиллированной воде, но это не всегда так. Если вы разбавляете бактерии или другие клетки, делайте это в культуральной среде. Выбранная вами жидкость будет использоваться для всех цепных разведений.
Если вы сомневаетесь, какой разбавитель использовать, обратитесь за помощью или поищите в Интернете. Поищите примеры других, которые сделали аналогичные цепные разведения
Шаг 2. Подготовьте несколько пробирок, содержащих 9 мл разбавителя
Пробирки используются для пустых разведений. Сначала поместите неразбавленный образец в первую пробирку, затем последовательно выполните разведения в следующих пробирках.
- Промаркируйте все используемые пробирки перед началом разведения, чтобы не запутаться после начала эксперимента.
- Каждая пробирка будет заполнена 10 разведениями, начиная с пробирки, вещество которой не было разбавлено. Разведение в первой пробирке составляет 1:10, затем 1: 100 во второй пробирке, 1: 1000 для третьей и так далее. Определите количество разбавления, которое необходимо провести заранее, чтобы не тратить раствор разбавителя.
Шаг 3. Подготовьте пробирку, содержащую не менее 2 мл неразбавленного раствора
Минимальное количество разбавляемого раствора, необходимое для выполнения этого цепного разбавления, составляет 1 мл. Если вы используете только 1 мл, неразбавленного раствора не останется. Этикетка BLM для неразбавленных растворов.
Тщательно перемешайте раствор перед началом любого разбавления
Шаг 4. Выполните первое разведение
Возьмите 1 мл неразбавленного раствора из пробирки BLM с помощью пипетки и поместите его в пробирку с меткой 1:10, содержащую 9 мл разбавителя, затем тщательно перемешайте. Теперь в 9 мл разбавителя находится 1 мл неразбавленного раствора. Таким образом, раствор был разбавлен с коэффициентом разбавления 10.
Шаг 5. Выполните второе разведение
Для второго разведения возьмите 1 мл раствора из пробирки 1:10, затем поместите его в пробирку 1: 100, которая также содержит 9 мл разбавителя. Перед добавлением в следующую пробирку убедитесь, что раствор в пробирке 1:10 полностью перемешан. Еще раз убедитесь, что раствор в пробирке 1: 100 полностью перемешан. Раствор из пробирки 1:10 разводили в 10 раз в пробирке 1: 100.
Шаг 6. Продолжите эту процедуру, чтобы выполнить разбавления с более длинной цепью
Этот процесс можно повторять столько раз, сколько необходимо для получения желаемой концентрации раствора. В экспериментах с использованием кривых концентрации можно выполнять цепные разведения для получения ряда растворов с разведениями 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.
Метод 2 из 2: Расчет коэффициента разбавления и конечной концентрации
Шаг 1. Рассчитайте коэффициент последнего разведения в цепочке разведения
Общий коэффициент разбавления может быть определен путем умножения коэффициента разбавления от каждого этапа до последнего этапа. Математическая иллюстрация представлена формулой Dт = D1 x D2 x D3 х… х D , Dт - общий коэффициент разбавления, а D коэффициент разбавления.
- Например, предположим, что вы делаете разведение 1:10 4 раза. Подставьте коэффициент разбавления в формулу: Dт = 10 х 10 х 10 х 10 = 10 000
- Фактор разбавления в четвертой пробирке в этом цепном разбавлении составляет 1: 10 000. Концентрация вещества после разбавления в 10 000 раз ниже, чем до разбавления.
Шаг 2. Определите концентрацию раствора после разведения
Чтобы определить конечную концентрацию раствора после цепного разбавления, необходимо знать его начальную концентрацию. Формула Cконец = Cначало/ОКРУГ КОЛУМБИЯконец - конечная концентрация разбавленного раствора, Cначало - начальная концентрация исходного раствора, а D - заданный коэффициент разбавления.
- Например: если вы начнете с раствора клеток, концентрация которого составляет 1000000 клеток на мл, а коэффициент разбавления равен 1000, какова конечная концентрация разбавленного образца?
-
Используя формулу:
- Cконец = Cначало/ D
- Cконец = 1.000.000/1.000
- Cконец = 1000 клеток на мл.
Шаг 3. Убедитесь, что все блоки одинаковые
При выполнении любого расчета убедитесь, что единицы измерения всегда одинаковы в конце расчета. Если исходная единица измерения - клетки на мл, убедитесь, что единицы остались прежними в конце расчета. Если исходная концентрация составляет частей на миллион (баррелей в сутки), то конечная концентрация также должна быть в единицах баррелей в сутки.
