Есть много способов измерить рост бактерий, и один из них сложнее другого. Хотя иногда необходимо игнорировать последовательность измерений, для точного измерения роста бактерий достаточно самого простого способа, поэтому он часто используется. Наиболее часто используемые методы - это мониторинг и подсчет бактерий, измерение сухой или влажной массы и измерение уровней мутности / мутности. В лаборатории вашей школы должны быть инструменты и оборудование, необходимые для проведения хотя бы одного из этих экспериментов.
Шаг
Метод 1 из 3: мониторинг бактерий вживую
Шаг 1. Подготовьте ингредиенты
Необходимо подготовить множество специальных инструментов, которые могут быть недоступны в биологических лабораториях. Подготовьте все оборудование и контейнеры перед проведением эксперимента, чтобы не было хлопот во время процесса. Вам нужно будет знать каждый ингредиент, который используется прямо сейчас, и основные условия этого эксперимента.
- Подготовьте счетную камеру. Он имеет встроенную камеру, стекло микроскопа и микроскоп, поэтому его легко настроить и использовать. Вы можете купить его в лаборатории или магазине школьных принадлежностей. Этот инструмент должен содержать инструкции, которые проведут вас через весь процесс.
- Приготовьте чашку для наливания или разложенную чашку. Оба этих контейнера позволяют следить за бактериями внутри.
- Культура - это термин, используемый для описания роста организмов в эксперименте.
- Бульон - жидкая среда, в которой растет культура.
Шаг 2. Используйте метод разливочной тарелки или разливной тарелки
Вы также можете поместить бактерии прямо на чашку для просмотра под микроскопом. Вылейте культуру на блюдце и поместите под микроскоп. Следите за количеством присутствующих бактериальных клеток.
Шаг 3. Убедитесь, что доза концентрации правильная
Если их слишком много, бактерии накапливаются друг на друге, и вы можете просчитаться. Разбавьте культуру, добавив еще бульона. Если их слишком мало, результаты расчета не будут точными. Процедите бульон с помощью системы фильтрации.
Шаг 4. Подсчитайте количество бактерий
Последний шаг - посчитать бактерии одну за другой. Посмотрите через увеличительную линзу в счетной камере и запишите количество бактерий, которые вы видите. Сравните результаты с результатами других тестов.
Метод 2 из 3: Измерение сухой и влажной массы
Шаг 1. Убедитесь, что у вас есть подходящее оборудование
Этот метод требует дорогостоящего оборудования и большого количества времени. Если в вашей лаборатории нет необходимого оборудования, рекомендуется использовать другой метод. Однако, если ваша лаборатория достаточно хорошо оборудована, мы рекомендуем этот метод, поскольку он обеспечивает более стабильные результаты. В этом методе вам понадобятся:
- Гидравлическая гравитационная конвекционная печь
- Емкость для взвешивания из алюминия
- Набор колб (лабораторных бутылок)
- Центробежная машина (центрифуга) или лабораторная система фильтрации
Шаг 2. Убедитесь, что культура находится в колбе
Добавьте культуру в тыкву. На этом этапе культура должна быть отваром, хотя позже она снова будет отделена.
Шаг 3. Высушите алюминиевый контейнер для взвешивания в лабораторной печи
Вместо этого вы можете использовать фильтрующую мембрану из ацетата целлюлозы диаметром 47 мм и размером пор 0,45 мкм. Какой бы весовой контейнер вы ни использовали, взвесьте его, так как его нужно будет вычесть позже при взвешивании бактериальных клеток.
Шаг 4. Перемешайте культуру в колбе до однородного перемешивания
Кювета опустится естественным образом под действием силы тяжести, и ее необходимо будет перемешать, чтобы она равномерно распределилась по колбе. Таким образом у вас может быть больше образцов.
Шаг 5. С помощью центрифуги отделите бактериальные клетки от бульона
Этот инструмент вращает колбу и быстро уравновешивается, чтобы слить бульон и оставить культуру в колбе.
Шаг 6. Соскребите пасту с тыквы и поместите ее в емкость для взвешивания
Выбросьте бульон, потому что он вам больше не нужен. Однако не стоит сразу же избавляться от тыквы, потому что она все равно будет использоваться.
Шаг 7. Промойте центробежную машину и налейте промывочную воду в емкость
Капните промывочную воду из колбы на бактериальные клетки, чтобы получить влажную массу.
Шаг 8. Найдите сухой вес
Чтобы измерить сухой вес, поместите контейнер в духовку и просушите при 100 ° C в течение 6-24 часов в соответствии с инструкциями для используемой духовки и / или емкости для взвешивания. Убедитесь, что температура не слишком высока, чтобы бактерии не сгорели. После завершения взвешивания бактерий и не забудьте уменьшить результат на вес емкости для взвешивания.
Метод 3 из 3: Измерение мутности
Шаг 1. Подготовьте необходимое оборудование
Вам понадобится источник света и спектрофотометр. И то, и другое можно приобрести в магазинах лабораторных принадлежностей. Спектрофотометр должен иметь инструкции, которые помогут вам использовать прибор в соответствии с вашей моделью. Цена спектрофотометра вполне доступна и прост в использовании, поэтому он может стать одним из наиболее часто используемых методов измерения роста бактерий.
Шаг 2. Зажгите образец
Согласно терминологии непрофессионала, мутность - это уровень мутности пробы. Вам необходимо получить число измерения мутности, которое измеряется в NTU (нефелометрическая единица мутности). Этот инструмент необходимо откалибровать, прежде чем он сможет точно измерить образец.
Шаг 3. Запишите результаты
На мутность влияет количество бактерий в образце. Спектрофотометр также покажет вам процент пропускания (% T). Этот показатель увеличится, если мутность уменьшится. Сравните результаты с результатами других тестов для измерения роста бактерий.
Предупреждение
- Поскольку вы имеете дело с бактериальной колонией, примите меры предосторожности, надев защитное снаряжение, такое как защитные очки и перчатки. Также неплохо надеть маску, особенно если вы не знаете, какие бактерии изучаются.
- Примите меры предосторожности перед тем, как обращаться с любыми бактериями, даже с безвредными. Перед началом убедитесь, что все открытые раны на вашем теле полностью закрыты.
